Дзякуй за наведванне Nature.com.Версія браўзера, якую вы выкарыстоўваеце, мае абмежаваную падтрымку CSS.Для найлепшага вопыту мы рэкамендуем вам выкарыстоўваць абноўлены браўзер (або адключыць рэжым сумяшчальнасці ў Internet Explorer).Тым часам, каб забяспечыць бесперапынную падтрымку, мы будзем візуалізаваць сайт без стыляў і JavaScript.
Посттраўматычнае стрэсавае засмучэнне (ПТСР) характарызуецца парушэннем здольнасці нейтралізаваць рэакцыю страху на сігналы, звязаныя з траўмай.Даследаванні на людзях і жывёлах паказваюць на адрозненні ва ўдзеле пэўных абласцей лобнай кары ў якасці ключавых медыятараў, якія вызначаюць поспех падаўлення страху, але ўзаемадзеянне нейронавых ланцугоў, якія вызначаюць дыферэнцыяльнае ўцягванне гэтых абласцей, не ясна.Каб лепш зразумець, як індывідуальныя адрозненні ў запамінанні вымірання адлюстроўваюцца на адрозненнях у актыўнасці нейрональных ланцугоў, мы пазначылі праекцыі сублімбічнай кары галаўнога мозгу (IL) пацукоў рэтраграднымі індэксамі і параўналі праекцыі нейронаў унутры і звонку праекцыйных нейронаў IL.Мы прааналізавалі гэтыя дадзеныя, згрупаваўшы іх па ступені захаванасці згасаючай памяці ў пацукоў.Мы выявілі, што ў клетках, якія праецыруюць IL, нейроны задняга параталамуса дэманструюць павышаную актыўнасць у пацукоў, якія добра запамінаюць выміранне.У дадатак да клетак, якія праецыруюць IL, павышаная актыўнасць Fos назіралася ў асобных абласцях клауструма пацукі і вентральнага гіпакампа з добрым дазволам.Нашы вынікі паказваюць, што адрозненні ў памяці вымірання звязаны са спецыфічнымі мадэлямі нервовай актыўнасці ўнутры і па-за праекцыямі IL.
Абумоўленне страху ўзнікае, калі нейтральны раздражняльнік звязаны з аверсіўным безумоўным раздражняльнікам (UCS), так што першапачаткова нейтральны раздражняльнік, цяпер умоўны стымул (CS), выклікае ўмоўную рэакцыю страху (CR) у адсутнасць UCS.Зварот умоўнага страху быў абумоўлены зніжэннем CR да CS з-за паўторнага прадстаўлення CS пры адсутнасці UCS1.Папярэднія даследаванні паказалі, што посттраўматычнае стрэсавае засмучэнне (ПТСР) звязана з няздольнасцю запомніць згасанне ўмоўных рэакцый страху2.Краевугольным каменем кагнітыўнай паводніцкай тэрапіі для лячэння посттраўматычнага стрэсавага расстройства з'яўляецца экспазіцыйная тэрапія, заснаваная на знішчэнні вывучаных рэакцый страху3,4.Такім чынам, даследаванні індывідуальных адрозненняў у страху вымірання грызуноў і асноўных нервовых механізмаў могуць дапамагчы высветліць адрозненні ў рэакцыі чалавека на траўму і лячэнне посттраўматычнага стрэсавага расстройства.Нягледзячы на ​​​​прагрэс у выяўленні нервовых механізмаў, якія адрозніваюць паспяховыя ўспаміны аб выміранні ад няўдалых, многае яшчэ трэба будзе адкрыць.
Мадэлі грызуноў карысныя ў гэтай працы, паколькі існуюць значныя індывідуальныя адрозненні ва ўспамінах пра выміранне грызуноў7,8,9,10.Папярэдняя праца па вывучэнні нейронавых механізмаў згасання страху на папуляцыйным узроўні паказала, што для ўспамінання згасання патрабуецца актывацыя інфралібічнай кары (спасылкі 11, 12, 13, але гл. 14), і некаторыя даследаванні выявілі зніжэнне дзейнасць грызуноў у IL дэманструе дрэнную памяць пра выміранне ў параўнанні з грызунамі, якіх вельмі баяцца.Аднак механізмы, з дапамогай якіх IL па-рознаму ўдзельнічаюць у палягчэнні ліквідацыі страху ў грызуноў у параўнанні з тымі, якія дэманструюць больш слабое выміранне, незразумелыя.
Адной з магчымасцей з'яўляецца тое, што адрозненні ў памяці аб згасанні страху паміж людзьмі з'яўляюцца вынікам дыферэнцыяльнай актывацыі спецыфічных аферэнтных IL.Анатамічныя даследаванні18 паказалі, што розныя коркавыя і падкоркавыя вобласці мозгу пасылаюць шчыльныя праекцыі ў IL, які, у сваю чаргу, пасылае эферэнтныя праекцыі ў многія вобласці мозгу.Даследаванні на папуляцыйным узроўні паказалі, што праекцыі IL на міндаліну важныя для набыцця знікнення страху20,21,22, а ўваход IL ад базолатеральной міндаліны (BLA) таксама звязаны з навучаннем знікненню.Даследаванняў аб удзеле IL-цэнтраваных ланцугоў у аднаўленні вымірання менш, хоць нядаўнія працы паказваюць, што як вентральны, так і дорсальный гіпакамп задзейнічаны ў прагназаванні IL.Эферэнтныя праекцыі ІЛ на рекомбинирующее ядро ​​таламуса, відаць, таксама ўдзельнічаюць у памяці згасання страху.
Гэтыя папярэднія даследаванні пачынаюць маляваць карціну ўзаемадзеяння нейронавых ланцугоў, якія ўдзельнічаюць у прыгадванні вымірання, але існуе вельмі мала дадзеных аб тым, ці ўплывае актыўнасць нервовых ланцугоў, арыентаваных на IL, на індывідуальныя адрозненні ў прыгадванні вымірання.Тут мы імкнуліся вызначыць, ці звязаны адрозненні ў памяці аб выміранні страху паміж людзьмі са зменамі ў актывацыі ўваходу IL у пэўных абласцях мозгу.У прыватнасці, мы ацанілі актывацыю IL афферентных клетак у паравентрикулярном ядры таламуса (PVT), ключыцы (CLA), BLA і вентрального гіпакампа (vHPC).Гэтыя вобласці мозгу былі выбраны як таму, што яны пасылаюць шчыльныя праекцыі ў IL, так і таму, што ёсць падставы падазраваць, што яны могуць удзельнічаць у выяўленні страху вымірання 18.Напрыклад, нядаўняе даследаванне паказала, што PVT, рэгіён, які, як вядома, удзельнічае ў набыцці і размнажэнні страху, неабходны для ўзнаўлення вымірання.Акрамя таго, папярэднія даследаванні паказалі павелічэнне базальнай міндаліны і актыўнасці vHPC у пацукоў, якія выяўляюць памяць аб выміранні.Нарэшце, аналіз клауструма больш даследчы, улічваючы, што ні ў адной з папярэдніх работ не ацэньвалася яго роля ў выміранні.Аднак нядаўнія працы паказваюць, што гэта адыгрывае пэўную ролю ў кантэкстуальнай абумоўленасці страху29.
Вірусныя GFP-кан'югаваныя рэтраградныя індыкатары ўводзіліся ў IL пацукоў перад паводніцкім тэставаннем, і актыўнасць Fos у аферэнтах IL вымяралася падчас прайгравання згасання, успамінання страху і ў пацукоў, якія не падвяргаліся паводніцкім тэставанням.Нашы вынікі паказваюць, што праекцыі ад задняга паравентрикулярного таламуса да IL паказваюць павышаную актыўнасць у пацукоў, якія паспяхова ўспамінаюць выміранне.У дадатак да прагнозаў IL, нейронавая актыўнасць у некаторых абласцях ключыцы і вентральнага гіпакампа павялічылася ў пацукоў, якія добра рэгрэсавалі.Нашы вынікі паказваюць, што заканамернасці ўнутранай і знешняй нейронавай актыўнасці, якія праецыруюцца на IL, звязаны з індывідуальнымі адрозненнямі ў памяці аб выміранні страху.
У якасці суб'ектаў выкарыстоўваліся 54 дарослых самца пацукоў Sprague-Dawley (300-325 г па прыбыцці), атрыманых з Charles River Laboratories (Raleigh, NC).Пацукі размяшчаліся парамі, са свабодным доступам да ежы і вадзе, у 12-гадзінным цыкле свет/цемра (святло запальваецца ў 7 раніцы).Для гэтых эксперыментаў былі выкарыстаны дзве групы пацукоў (n = 28 і n = 26).Пасля выключэння смерці, хірургічнай памылкі, адсутнасці экспрэсіі GFP у месцы-мішэні, дрэннай якасці тканіны і паводніцкіх праблем (тлумачыцца ў Метадах), група ўспамінання вымірання ўключала 21 пацука, а група ўспамінання страху ўключала 7 пацукоў, хатнія клеткі.група складалася з 7 пацукоў (35 пацукоў былі ўключаны ў канчатковы аналіз).Усе працэдуры былі зацверджаны Інстытуцыйным камітэтам па доглядзе і выкарыстанні жывёл Універсітэта Стоні Брук і адпавядалі рэкамендацыям ARRIVE (https://arriveguidelines.org) і рэкамендацыям NIH па догляду і выкарыстанні лабараторных жывёл.
Пацукоў лячылі за два дні да аперацыі.Пацукоў анестэзавалі кетамінам (87 мг/кг) і ксілазінам (10 мг/кг), змясцілі ў стэрэатаксічны апарат (Stoelting, Woodale, IL) і атрымалі аднабаковыя ін'екцыі AAVrg-CAG-GFP (Addgene, 30) у IL.(баланс левых і правых ін'екцый).Для ін'екцыі канюлю 22-га калібра апускалі на месца (AP: + 3,00, ML: ± 0,6, DV: - 5,2).Устаўце ўнутраную канюлю 28G (злучаную з інфузійнай помпай праз трубку PE 20) у накіроўвалую канюлю для дастаўкі 0,6 мкл віруса з хуткасцю 0,15 мкл у хвіліну і пакіньце на месцы на 5 хвілін пасля таго, як інфузорыя застанецца цэласнай..Пасля накладання швоў пацукам ўвялі мелоксикам (1 мг/кг) і, як толькі яны сталі рухацца, іх вярнулі ў клеткі.Пацукоў трымалі ў клетках каля 7 тыдняў, каб вірус мог аднавіцца і рэтраградна перамяшчацца.Тры пацукі памерлі пад наркозам, у выніку чаго 51 пацук (94%) паспяхова аднавіўся пасля аперацыі.
Усе працэдуры праводзіліся ў камерах кандыцыянавання 32 см × 25 см × 21 см (Clever Systems Inc., Reston, VA), размешчаных у гукапаглынальных ізаляцыйных боксах памерам 45,7 см × 43,2 см × 43,2 см (Clever Sys. . Inc.).).Падчас сеансаў вывучэння вымірання і ўзгадвання вымірання кантэкст быў зменены, каб адрознівацца ад зыходнага ўмоўнага кантэксту.Умова A (генерацыя страху) уключала 28-вольтавыя лямпы напальвання, бытавыя лямпы (Chicago Micro Lighting, Вялікабрытанія), у той час як умова B (навучанне выміранню, тэст на ўспамінанне вымірання і тэст на ўспамінанне страху) уключала інфрачырвоныя святлодыёдныя лямпы (Univivi IR Illuminator, Шэньчжэнь). ., Кітай;U48R).Акрамя таго, у той час як Context A мае антывібрацыйную падлогу з рашоткамі са сценкамі з нержавеючай сталі і аргшкла, Context B змяшчае афарбаваныя металічныя ўстаўкі, размешчаныя на падлозе і сценах.Форма Context B таксама была зменена шляхам размяшчэння выгнутай металічнай устаўкі памерам 33,5 см x 21,3 см у стандартную камеру кандыцыянавання.Акрамя таго, у кантэксце А камеры праціралі 5% воцатнай кіслатой, а ў кантэксце Б камеры праціралі 5% гідраксідам амонія.Нарэшце, у кантэксце B пацукоў прывозілі ў пакой для выпрабаванняў у вёдрах, а не каталі ў клетках на калясках.Паводніцкія сеансы запісваліся з дапамогай верхняй камеры, а відэасігнал з кожнай камеры паступаў у праграмнае забеспячэнне (FreezeScan 2.00, Clever Sys. Inc., Рэстан, штат Вірджынія), якое ацэньвала паводзіны знікнення на аснове змены пікселяў.Параметры былі выбраны такім чынам, каб паводзіны замірання, ацэненыя кампутарам, дакладна адпавядалі паводзінам падрыхтаваных назіральнікаў, ацэненых уручную.Значэнне, якое паказвае працэнт часу замарожвання, згорнуты ў 30-секундны інтэрвал.
Усе паводніцкія праграмы выконваюцца падчас светлай часткі цыкла свет/цемра.Пацукоў апрацоўвалі за 5 дзён да пачатку паводніцкіх працэдур і перавозілі ў пакой паводніцкіх на працягу апошніх трох дзён лячэння.У першы дзень паводніцкага тэставання групу пацукоў, якія ўспамінаюць аб выміранні, змясцілі ва ўмоўны рэфлекс страху, затым змясцілі ў кантэкст А, далі 6 хвілін нестымуляванага перыяду акліматызацыі, а затым далі абедзве камбінацыі 4 кГц, 76 дБ, 30 с .тон і агульнае спыненне, 1,0 мА, удар 1 с (2 мін ITI).Для ўсіх паводніцкіх трэніровак пацукоў вярнулі ў клеткі праз 2 хвіліны пасля апошняга ўвядзення стымулу.На наступны дзень пацукоў з групы знікнення-адклікання змясцілі ў кантэкстны пакой B і правялі 20 гукавых прэзентацый (2 хвіліны ITI) у якасці трэніроўкі знікнення пасля 6-хвіліннага перыяду прывыкання.На наступны дзень пацукі ў групе рэпрадукцыі вымірання падвяргаліся ўздзеянню 4 тонаў у кантэксце B пасля 6-хвіліннага перыяду акліматызацыі ў якасці тэсту на выміранне.Пацукі ў групе памяці аб выміранні былі перфузаваныя праз 60 хвілін пасля паводніцкага сеансу.Групу кантрольных пацукоў, якія выклікалі ўспаміны страху, падвергнулі такой жа працэдуры ў першы дзень рэакцыі, абумоўленай страхам, у кантэксце А. Праз сорак восем гадзін пацукоў змясцілі ў кантэкстны пакой В і падверглі 4 аўдыёпрэзентацыям (2- хвіліна ITI) у якасці тэсту на запамінанне.страх пасля 6-хвіліннага перыяду акліматызацыі.Пацукоў перфузировали праз 60 хвілін пасля паводніцкага сеансу.Група хатніх кантрольных пацукоў заставалася ў сваіх хатніх клетках на працягу ўсяго эксперыменту і была апрацавана ў той жа дзень, што і паддоследныя пацукі.Кожную з дзвюх груп пацукоў падзялілі на дзве серыі, і колькасць жывёл у кожнай групе ўраўнаважвалі паміж серыямі.Адзін пацук у групе ўспамінаў страху быў выключаны з аналізу, таму што не выяўляў прыкмет абумоўленасці страхам (замярзанне менш за 15% часу падчас тэсту ўспамінаў страху).Глядзіце малюнак 2A для дыяграмы паводніцкай часовай шкалы.
Пацукам увялі перадазіроўку растворам Fatal Plus (100 мг/кг), затым перфузировали ледзяным 10% PBS з наступным 10% буферным фармалінам.Мозг выдалялі і захоўвалі ў 30% растворы цукрозы ў фармаліне пры 4 ° С каля 1 тыдня.Затым мозг замарозілі і разрэзалі на крыястат таўшчынёй 40 мкм.Зрэзы захоўвалі паслядоўна ў 10% PBS пры 4°C.Затым імунафлюарэсцэнцыю праводзілі на свабодна плаваючых зрэзах, якія змяшчаюць цікавую вобласць мозгу.Зрэзы прамывалі 3 разы ў 10% PBS па 5 хвілін кожны.Затым зрэзы інкубавалі ў 5% блакавальным растворы нармальнай казінай сыроваткі на працягу 2 гадзін пры пакаёвай тэмпературы, а затым прамывалі яшчэ тры разы па 5 хвілін у 10% PBS.Затым зрэзы інкубавалі на працягу ночы пры 4°C у першасных антыцелах (c-Fos, #2250, 1:500) (Cell Signaling, Danvers, MA), разведзеных у 1% BSA ў 10% PBS.На наступны дзень зрэзы прамывалі ў 10% PBS на працягу 30 хвілін пры 4°C, затым 3 разы па 5 хвілін у 10% PBS і інкубавалі з другасным антыцелам (Alexa Fluor 594 казіныя анты-трусіны, чырвоны кан'югат, 1:500 ).) (Invitrogen, Карлсбад, Каліфорнія) пры пакаёвай тэмпературы на працягу 2 гадзін.Пасля 3 дадатковых прамыванняў у 10% PBS на працягу 5 хвілін зрэзы змяшчалі на прадметныя шкла і запячатвалі Fluoromount-G (Invitrogen).Глядзіце тыповыя выявы імуннага афарбоўвання на малюнку 3G.
Флуарэсцэнтны мікраскоп з выкарыстаннем лічбавай камеры Infinity3 (Lumenera, Атава, Антарыё, Канада) і светлавога рухавіка (Lumencor, Beaverton, OR), падлучанага да мікраскопа Zeiss, выкарыстоўваўся для атрымання малюнкаў кожнай вобласці мозгу, якая цікавіць, у тым ліку секцый, якія змяшчаюць ІЛ без иммунофлюоресценции.праводзіцца для пацверджання правільнага размяшчэння месца ін'екцыі.Выявы, якія выкарыстоўваліся для падліку клетак, былі атрыманы пры 20-кратным павелічэнні.Для кожнага ўчастка тканіны зрабіце адзін здымак з фільтрам, які дазваляе візуалізаваць GFP, і адзін здымак з фільтрам, які дазваляе візуалізаваць чырвоны кан'югат Alexa Fluor у другасных антыцелах; для выявы выкарыстоўвалася праграмнае забеспячэнне для візуалізацыі (Infinity Analyze, версія 3). накладка.Атрымайце ўсе выявы ўсіх абласцей мозгу з аднолькавымі наладамі часу экспазіцыі і ўзмацнення.Шэсць пацукоў былі выключаны з аналізу, таму што асноўная перадача віруса адбылася за межамі ІЛ (88% узровень траплення).Яшчэ восем пацукоў былі выключаны, таму што, нягледзячы на ​​​​атаку віруса IL, яны не паказалі дастатковай экспрэсіі GFP ва ўсіх мэтавых абласцях мозгу, якія цікавяць.Акрамя таго, адна пацук была выключана з-за нізкай якасці тканіны.
Адрэгулюйце яркасць і кантраснасць, каб паменшыць фонавы шум на малюнку J (NIH), выкарыстоўваючы адну і тую ж працэдуру для кожнага відарыса.Падлік клетак для агульнай колькасці рэтраградна пазначаных клетак, агульнай колькасці клетак, пазначаных Fos, і агульнай колькасці клетак з падвойнай пазнакай праводзіўся ўручную эксперыментатарам, які не ідэнтыфікаваў жывёл, з дапамогай плагіна цытометра Image J.Колькасць клетак нармалізавалі да клетак/мм2.Каб прааналізаваць экспрэсію Fos у IL-праецыруючых клетках, колькасць двайны пазначаных клетак нармалізавалі да агульнай колькасці рэтраградна пазначаных клетак.Для аналізу mBLA, mvHPC і pvHPC колькасць клетак з некалькіх 20-кратных малюнкаў была прасумавана і нармалізавана да клетак/мм2.Для аналізу астатніх абласцей мозгу выява ў 20x або частка выявы ў 20x была прааналізавана і нармалізавана да клетак/мм2.Аналіз vHPC уключаў вобласці CA1, CA2 і субдамінантныя вобласці vHPC.На малюнку 1 паказаны вобласці мозгу, прааналізаваныя з дапамогай малюнкаў, якія акрэсліваюць пярэдне-заднюю мяжу плоскасці.
Абрэвіятуры і размяшчэнне цікавых абласцей мозгу.Тлумачэнне абрэвіятур і размяшчэнне абласцей мозгу, прыведзеных у рукапісе.Карта мозгу, якая знаходзіцца ў адкрытым доступе, узятая з Swanson (2004) Brain Map: Structure of the Rat Brain, 3rd Edition, ліцэнзавана па міжнароднай ліцэнзіі Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 (https://creativecommons.org/licenses/by-nc/ 4.0) ./), даступны для спампоўкі на https://larrywswanson.com.
Працэнт часу замарожвання асераднёны за 30-секундны перыяд прайгравання тону, за выключэннем прамежкавых інтэрвалаў.Паказчыкі ўспамінання аб згасанні былі разлічаны шляхам выражэння працэнта часу замірання падчас адклікання згасання як адсотка замірання падчас першых 4 трэніровачных выпрабаванняў згасання (заміранне падчас чатырох тонаў адклікання згасання/заміранне на працягу першых чатырох трэніровак згасання*100).Нізкія балы паказваюць на добрую памяць аб знікненні, а высокія паказваюць на дрэнную памяць.Пацукі былі адсартаваны па ацэнцы запамінання вымірання, прычым пацукі ў верхняй траціне ацэнкі запамінання вымірання былі класіфікаваны як «дрэнныя пацукі вымірання», а пацукі з апошнімі дзвюма трацінамі ацэнкі запамінання вымірання былі класіфікаваны як «добрыя».Пацукі згасаюць з памяці.
Непараметрычныя тэсты выкарыстоўваюцца, таму што дадзеныя часта парушаюць здагадкі аб нармальным размеркаванні і/або аднастайнасці дысперсій.Рангавая карэляцыя Спірмена была выкарыстана для вызначэння таго, ці існуе значная сувязь паміж баламі запамінання вымірання і маркерамі Fos і падвойнымі маркерамі ў цікавых абласцях мозгу ва ўсіх пацукоў, якія падвяргаліся тэсту на запамінанне вымірання.Для вызначэння розніцы паміж дзвюма незалежнымі групамі выкарыстоўваўся U-тэст Мана-Уітні.Тэст Крускала-Уоліса выкарыстоўваецца, каб вызначыць, ці адрозніваюцца 2 ці больш груп адна ад адной, а тэст множнага параўнання Дана выкарыстоўваецца, калі статыстыка Краскала-Уоліса значная.Затуханне падчас навучання з выміраннем ацэньвалася з дапамогай дысперсійнага аналізу паўторных вымярэнняў з групай у якасці міжпрадметнага фактару і тэсту як унутрыпрадметнага фактару. Вынікі лічыліся значнымі, калі р <0,05 для ўсіх статыстычных тэстаў. Вынікі лічыліся значнымі, калі р <0,05 для ўсіх статыстычных тэстаў. Вынікі лічыліся значнымі пры p < 0,05 для ўсіх статыстычных тэстаў. Вынікі лічыліся значнымі пры р <0,05 для ўсіх статыстычных тэстаў.当所有统计检验的p < 0,05 时，结果被认为是显着的。当所有统计检验的p < 0,05 时，结果被认为是显着的。 Вынікі лічыліся значнымі пры p < 0,05 для ўсіх статыстычных тэстаў. Вынікі лічыліся значнымі пры р <0,05 для ўсіх статыстычных тэстаў.
На малюнку 2 паказаны эксперыментальны графік (малюнак 2A) і размеркаванне частоты ўсіх пацукоў, якія падвергліся знікненню (малюнак 2B). Пацукі ў групах добрага і дрэннага вымірання істотна адрозніваліся ў гэтых разліковых ацэнках вымірання (U = 0, p <0,001) (мал. 2C). Пацукі ў групах добрага і дрэннага вымірання істотна адрозніваліся ў гэтых разліковых ацэнках вымірання (U = 0, p <0,001) (мал. 2C). Крыжы ў групах з добрым і дрэнным угашэннем значна адрозніваліся па гэтым рассчитанным паказчыкам прыгадвання ўгашэння (U = 0, p <0,001) (рыс. 2C). Пацукі ў групах добрага і дрэннага вымірання істотна адрозніваліся ў гэтых разліковых паказчыках запамінання вымірання (U=0, p<0,001) (малюнак 2C).在这些计算的灭绝回忆分数中，良好和不良灭绝组中的大鼠存在显着差异＂(U = 0，p<0,001）（图). 2C). U = 0, p <0,001) (图2C, У гэтых рассчитанных паказчыках прыпамінання ўгашэння крысы ў групах з добрым і плохім угашэннем значна адрозніваліся (U = 0, p <0,001) (рыс. 2C). У гэтых разліковых хуткасцях запамінання вымірання пацукі ў групах добрага і дрэннага вымірання істотна адрозніваліся (U = 0, p <0,001) (малюнак 2C).Не было істотнай розніцы ў часе замарожвання паміж групамі з добрым знікненнем, дрэнным знікненнем і запамінаннем страху на працягу базавага перыяду сеансу ўмоўнага рэфлексу страху (X2(2) = 2,746, p = 0,253) (малюнак 2D).Акрамя таго, пры прад'яўленні першага тоны ўмоўнага рэфлексу страху не было істотнай розніцы ў часе замарожвання паміж групамі з добрым згасаннем, дрэнным згасаннем і запамінаннем страху (X2(2) = 1,107, p = 0,575), т.к. а таксама падчас страху падчас другіх тонаў.Падчас сеансу кандыцыянавання назіралася значная розніца ў часе замарожвання паміж групамі з добрым выміраннем, дрэнным выміраннем і запамінаннем страху (X2(2) = 2,214, p = 0,331) (малюнак 2D).Таксама не было істотнай розніцы ў часе замірання паміж групамі добрага і дрэннага вымірання падчас базавага перыяду навучання выміранню (U = 45,00, p = 0,799) (малюнак 2D). Далей назіраўся значны асноўны ўплыў пробнага блока (5 тонаў на блок) на час, затрачаны на замарожванне падчас трэніроўкі па выміранню (F (2,884, 54,80) = 8,331, p <0,001), што паказвае на тое, што адбылося навучанне пагашэнню (мал. 2D). ). Далей назіраўся значны асноўны ўплыў пробнага блока (5 тонаў на блок) на час, затрачаны на замарожванне падчас трэніроўкі па выміранню (F (2,884, 54,80) = 8,331, p <0,001), што паказвае на тое, што адбылося навучанне пагашэнню (мал. 2D). ). Затым назіраўся значны асноўны эфект пробнага блока (5 тон на блок) на час, які затрачваецца на заміранне падчас трэніроўкі ўгашэння (F (2,884, 54,80) = 8,331, p <0,001), што паказвае на тое, што навучанне ўгашэнню адбылося ( рыс. 2D). Затым назіраўся значны асноўны ўплыў пробнага блока (5 тонаў на блок) на час, неабходны для замарожвання падчас трэніровак па згасанню (F(2,884, 54,80) = 8,331, р <0,001), што паказвае на тое, што адбывалася навучанне па згасанню (мал. .2D). ).接下来，在消退训练期间，试块（每块5 音）对冻结时间有显着的主效应（F（2,884，54,80）=8,3 31，p <0,001），表明发生了消退学习（图2D） ） .接下来，在消退训练期间，试块（每块5 音）对冻结时间有显着的主效应（F（2,884，54,80）=8,3 31，p <0,001），表明发生了消退学习（图2D） ） . Затым, падчас навучання ўгашэнню, пробныя блокі (5 тон на блок) аказалі значнае асноўнае ўплыў на час замірання (F (2,884, 54,80) = 8,331, p <0,001), што паказвае на тое, што навучанне ўгашэнню адбылося (рыс .2D). Затым, падчас вывучэння экстинкции, пробныя блокі (5 тонаў на блок) аказалі значны асноўны ўплыў на час замірання (F(2,884, 54,80) = 8,331, p <0,001), што сведчыць аб тым, што навучанне экстинкции мела месца (мал. 2D) .Аднак група знікнення (F(1, 19) = 3,091, p = 0,095) не мела істотнага ўплыву на час знікнення на працягу ўсяго перыяду навучання знікненню, і не было ўзаемадзеяння паміж пробным блокам і групай знікнення (F(4 , 19)).76) = 1,890, p = 0,121) (мал. 2D). Падчас сеансу тэсціравання была значная розніца паміж групамі з добрым знікненнем, дрэнным знікненнем і страхам у памяці ў часе, затрачаным на замарожванне на працягу базавага перыяду (X2 (2) = 8,569, p = 0,014), так што група, якая ўспамінала страх, значна замерла. больш, чым група добрага вымірання (Сярэдняя розніца ў рангах = 10,57, p = 0,017), але не група з дрэнным выміраннем (Сярэдняя розніца ў рангах = − 3,714, p > 0,999) (мал. 2D). Падчас сеансу тэсціравання была значная розніца паміж групамі з добрым знікненнем, дрэнным знікненнем і страхам у памяці ў часе, затрачаным на замарожванне на працягу базавага перыяду (X2 (2) = 8,569, p = 0,014), так што група, якая ўспамінала страх, значна замерла. больш, чым група добрага вымірання (Сярэдняя розніца ў рангах = 10,57, p = 0,017), але не група з дрэнным выміраннем (Сярэдняя розніца ў рангах = − 3,714, p > 0,999) (мал. 2D).Падчас сеансу тэсціравання была значная розніца паміж групамі з добрым знікненнем, дрэнным знікненнем і страхам у памяці ў часе, затрачаным на замарожванне на працягу базавага перыяду (X2(2) = 8,569, p = 0,014), такая, што група з успамінаннем страху застыла значна .больш, чым у групе добрага вымірання (сярэдняя разніца рангаў = 10,57, p = 0,017), але не ў групе дрэннага вымірання (сярэдняя разніца рангаў = -3,714, p> 0,999) (рыс. 2D). больш, чым у групе добрага вымірання (сярэдняя розніца ў рангах = 10,57, p = 0,017), але не ў групе з дрэнным выміраннем (сярэдняя розніца ў рангах = -3,714, p > 0,999) (малюнак 2D).在测试期间，良好消退组、不良消退组和恐惧回忆组在基线期冻结时间方面存在显着差异（X2 (2) = 8,569，p = 0,014，因此恐惧回忆组冻结显着超过良好的灭绝组（平均秩差= 10,57，p = 0,017），但不是差的灭绝组＄(平均秩差= – 3,714，p> 0,999）（图2D）).在 测试 期间 ， 良好 消退组 、 消 退组 和 恐惧 在 基线期 冻结 时间 方面 存在 显着 差异（（x2 (2) = 8,569 ， p = 0,014） 恐惧 回忆组 冻结 显着 良好 的 组 组 组 组 组组 组 组（平均秩差= 10,57，p = 0,017），但不是差绝组，(平均秩差= – 3,714，p > 0,999）（图2D）). За перыяд тэставання назіралася значная разніца паміж групай з добрым угашэннем, групай з плохім угашэннем і групай з прыпамінаннем страху з пункту гледжання часу замірання на зыходным узроўні (X2 (2) = 8,569, p = 0,014), таму прыпамінанне страху група замерзае значна часцей. , чым група з добрым выміраннем (сярэдняя разніца рангаў = 10,57, p = 0,017), але не група з плохім выміраннем (сярэдняя разніца рангаў = -3,714, p> 0,999) (рыс. 2D). Падчас перыяду тэсціравання была значная розніца паміж групай з добрым выміраннем, групай з дрэнным выміраннем і групай, якая ўспамінала страх, з пункту гледжання часу замарожвання на зыходным узроўні (X2(2) = 8,569, p = 0,014), таму ўспамінанне страху група замярзае значна часцей, чым група з добрым знікненнем (сярэдняя розніца ў рангах = 10,57, p = 0,017), але не група з дрэнным знікненнем (сярэдняя розніца ў рангах = -3,714, p > 0,999) (малюнак 2D).Група з добрым знікненнем, група з дрэнным знікненнем і група з прыгадваннем страху таксама мелі істотна розны час знікнення падчас прэзентацыі тону тэставай сесіі (X2(2) = 14,93, p = 0,001), таму ў групы з добрым знікненнем было значна менш час.час замярзання, чым у групе са слабым выміраннем (сярэдняя розніца ў рангах = 9,286, р = 0,044) і групе памяці страху (сярэдняя розніца ў рангах = 13,86, р = 0,001) (мал. 2D).
Індывідуальныя адрозненні ў памяці знікнення.(А) Схема хірургічных і паводніцкіх працэдур.(B) Размеркаванне частот, якое паказвае індывідуальныя адрозненні ў знікаючых балах памяці.(C) Доказы таго, што групы, распрацаваныя на аснове вылічаных балаў запамінання вымірання, прадстаўляюць два розныя фенатыпу.(D) Сярэдні працэнт часу, на працягу якога пацукі замярзаюць для дрэннага згасання, добрага згасання і ўспамінання страху ў 30-секундных клетках сеансу ўмоўнага рэфлексу страху, у тонах 20, 30 с, згорнутых у 5 блокаў падчас сеанса вывучэння згасання (4 тоны). .кожны), і ў чатырох тонах у сеансах успамінаў аб згасанні і ўспамінах страху.Слупкі памылак прадстаўляюць стандартнае адхіленне сярэдняга значэння. *p <0,05, **p <0,01, ***p <0,001, ****p <0,0001. *p <0,05, **p <0,01, ***p <0,001, ****p <0,0001. *р < 0,05, **р < 0,01, ***р < 0,001, ****р < 0,0001. *p <0,05, **p <0,01, ***p <0,001, ****p <0,0001. *p <0,05，**p <0,01，***p <0,001，****p <0,0001. *p <0,05，**p <0,01，***p <0,001，****p <0,0001. *р < 0,05, **р < 0,01, ***р < 0,001, ****р < 0,0001. *p <0,05, **p <0,01, ***p <0,001, ****p <0,0001.
Рэтраградны індыкатар быў уведзены ў IL (мал. 3A) і была вызначана колькасць GFP + клетак уздоўж пярэдняй-задняй восі цікавай вобласці (мал. 3B-F).Была значная розніца ў колькасці GFP+ клетак паміж пярэдняй, сярэдняй і задняй PVT (X2(2) = 8,200, p = 0,017), таму mPVT паказала значна больш GFP+ клетак, чым aPVT (сярэдні ранг) Diff.= 18,37, p = 0,035) і pPVT (сярэдняе ранг Diff. = 17,71, p = 0,045) (мал. 3C).Нягледзячы на ​​​​тое, што некаторыя жывёлы не выявілі клетак GFP+ у pCLA і таму не змаглі адлюстраваць актыўнасць у гэтай вобласці, не было значнай розніцы паміж пярэдняй, сярэдняй і задняй CLA (X2(2) = 5,596, p = 0,061).Колькасць ячэек GFP+ (малюнак 3D).Затым, паколькі некаторыя клеткі GFP+ былі знойдзены ў aBLA або avHPC у некалькіх пацукоў, былі прааналізаваны толькі сярэдзіна і задняя частка гэтых абласцей.Сярэдняя і задняя BLA (U=393, p=0,009) істотна адрозніваліся па колькасці клетак GFP+, таму pBLA паказала больш праекцый IL, чым mBLA (малюнак 3E).Падобным чынам была значная розніца паміж сярэднім і заднім vHPCs, таму pvHPCs паказалі больш прагнозаў IL, чым mvHPCs (U = 403,5, p = 0,014) (мал. 3F).Малюнак 3G - прыкладны відарыс, на якім паказаны Fos, aavRG-GFP і клеткі з падвойнымі пазнакамі.
Колькасна ацэніце аферэнты IL ва ўсёй вобласці мозгу, якая вас цікавіць.(A) Схематычнае прадстаўленне размеркавання aavRG-CAG-GFP ў цэлым пацучынага IL.(B) Рэпрэзентатыўныя выявы рэтраграднай маркераў у розных переднезаднем аддзелах у цікавай вобласці мозгу.Колькасная ацэнка рэтраграднай маркіроўкі ўздоўж переднезадней восі (C) паравентрикулярного таламуса, (D) ключыцы, (E) базолатеральной міндаліны і (F) вентральнага гіпакампа.(G) Рэпрэзентатыўныя выявы, якія паказваюць рэтраградную маркіроўку aavRG, маркіроўку Fos і падвойную маркіроўку aavRG і Fos у aPVT.Слупкі памылак прадстаўляюць стандартнае адхіленне сярэдняга значэння. *p <0,05, **p <0,01. *p <0,05, **p <0,01. *р < 0,05, **р < 0,01. *p <0,05, **p <0,01. *p <0,05, **p <0,01. *p <0,05, **p <0,01. *р < 0,05, **р < 0,01. *p <0,05, **p <0,01.Шкала 100 мкм.Карта мозгу, якая знаходзіцца ў адкрытым доступе на панэлі A, узятая з Swanson (2004) Brain Map: Rat Brain Structure, 3rd Edition, ліцэнзаванай па міжнароднай ліцэнзіі Creative Commons Attribution-NonCommons 4.0 (https://creativecommons.org/licenses/by-nc )./4.0/), даступны для спампоўкі на https://larrywswanson.com.
Глабальная і спецыфічная для праекцыі IL актыўнасць Fos была прааналізавана ў aPVT, mPVT і pPVT ва ўсіх пацукоў.Не было істотнай розніцы паміж добрым выміраннем, дрэнным выміраннем, узгадваннем страху і хатнімі групамі клетак у экспрэсіі Fos у aPVT (X2(3) = 3,888, p = 0,274) (мал. 4A), а таксама не было значнай карэляцыі паміж Fos у aPVT паміж экспрэсіяй і адкліканнем вымірання (rs = 0,092, p = 0,691) (малюнак 4B) або паміж экспрэсіяй Fos у аферэнтах aPVT IL і адкліканнем адмірання (rs = 0,143, p = 0,537) (малюнак 4D).Аднак у аферэнтах aPVT IL экспрэсія Fos істотна адрознівалася паміж групамі клетак з добрым выміраннем, дрэнным згасаннем, прыгадваннем страху і хатнімі клеткамі (X2(3) = 15,05, p = 0,002), таму група прыгадвання страху паказала адносна добрае выміранне.рэгрэсія (сярэдняя розніца ў рангах = 11,54, р = 0,003), дрэнная рэгрэсія (сярэдняя розніца ў рангах = 10,57, р = 0,034) і хатняя клетка (сярэдняя розніца ў рангах = 12,79, р = 0,005) групы (мал. 4C).Акрамя таго, не было істотнай розніцы паміж добрым выміраннем, дрэнным выміраннем, узгадваннем страху і групамі хатніх клетак для экспрэсіі Fos пры mPVT (X2(3) = 2,272, p = 0,518) (мал. 4E) і для экспрэсіі Fos пры mPVT..Значная карэляцыя з успамінам пра выміранне (rs = 0,168 p = 0,468) (малюнак 4F).Нягледзячы на ​​​​тое, што была істотная розніца паміж групамі добрых, дрэнных, узгадвання страху і хатнімі клеткамі ў экспрэсіі Fos у аферэнтных клетках IL mPVT (X2(3) = 9,252, p = 0,026), апошняе параўнанне не выявіла ніводнага, ні двух.Істотныя адрозненні паміж групамі (малюнак 4G).Акрамя таго, не было значнай карэляцыі паміж экспрэсіяй Fos у IL-аферэнтных клетках mPVT і адкліканнем вымірання (rs = 0,174, p = 0,450) (малюнак 4H). Далей была значная розніца паміж групамі добрага вымірання, дрэннага вымірання, узгадвання страху і хатняй клеткі ў экспрэсіі Fos у pPVT (X2 (3) = 13,89, p = 0,003), такая, што група добрага вымірання (сярэдні рэйтынг Diff. = 14,96, p = 0,010), але не слабае выміранне (Mean Rank Diff. = 12,86, p = 0,113) або група прыгадвання страху (Mean Rank Diff. = 2,571, p > 0,999), якія паказваюць большы выраз Fos, чым група група хатняй клеткі (мал. 4I). Далей была значная розніца паміж групамі добрага вымірання, дрэннага вымірання, узгадвання страху і хатняй клеткі ў экспрэсіі Fos у pPVT (X2 (3) = 13,89, p = 0,003), такая, што група добрага вымірання (сярэдні рэйтынг Diff. = 14,96, p = 0,010), але не слабае выміранне (Mean Rank Diff. = 12,86, p = 0,113) або група прыгадвання страху (Mean Rank Diff. = 2,571, p > 0,999), якія паказваюць большы выраз Fos, чым група група хатняй клеткі (мал. 4I). Далей назіралася значная разніца паміж групамі з добрым угашэннем, плохім угашэннем, водгукам страху і хатняй клеткі ў экспрэсіі Fos у pPVT (X2 (3) = 13,89, p = 0,003), так што група з добрым угашэннем (сярэдні ранг Diff. = 14,96, p = 0,010), але не ў групе дрэннага ўгашэння (сярэдняя рангавая разніца = 12,86, p = 0,113) або групе ўспамінаў аб страху (сярэдняя рангавая разніца = 2,571, p > 0,999), дэманстравалася больш. выражаная экспрэсія Fos, чым у групе групы хатніх клетак (рыс. 4I). Акрамя таго, была значная розніца паміж групамі добрых выміранняў, дрэнных выміранняў, узгадвання страху і хатніх клетак у экспрэсіі Fos у pPVT (X2(3)=13,89, p=0,003), так што група добрага вымірання (сярэдняе ранг Diff. = 14,96, p = 0,010), але не ў групе дрэннага вымірання (сярэдняя розніца ў рангах = 12,86, p = 0,113) або ў групе памяці страху (сярэдняя розніца ў рангах = 2,571, p > 0,999), паказалі больш выяўленую экспрэсію Fos, чым у група хатняй клеткі (малюнак 4I).其次 ， ppvt 中 fos 表达 好 消 、 差消 、 恐惧 和 家笼组 之间 存在 显着 差异 （x2 （3） = 13,89 ， p = 0,003） 使得 消组 （（сярэдні ранг Difff.= 14,96, p = 0,010)，但不是较差的消退(Сярэдняя розніца ў рангах = 12,86, p = 0,113) 或恐惧回忆组(Сярэдняя розніца ў рангах = 2,571, p > 0,999)，比家庭笼组（图4I ）.= 14,96, p = 0,010)，但不是较差的消退 (Сярэдняя розніца ў рангах = 12,86, p = 0,113) ，。Па-другое, былі значныя адрозненні ў экспрэсіі Fos у pPVT паміж групамі добрых, дрэнных, прыгадвання страху і хатнімі клеткамі (X2(3) = 13,89, p = 0,003), што зрабіла групу добрага спажывання (сярэдняя розніца ў рангах = 14,96)., p = 0,010), але не хужэй па пагашэнні (сярэдняя разніца рангаў = 12,86, p = 0,113) або групе водгукаў страху (сярэдняя разніца рангаў = 2,571, p > 0,999), чым у групе хатніх клетак (рыс. 4I) . , p = 0,010), але не горш у групе вымірання (сярэдняя розніца ў рангах = 12,86, p = 0,113) або страху ўспомніць групу (сярэдняя розніца ў рангах = 2,571, p> 0,999), чым група хатняй клеткі (мал. 4I)..Аднак не было значнай карэляцыі паміж экспрэсіяй pPVT Fos і запамінаннем вымірання (rs = 0,051, p = 0,825) (малюнак 4J).Нарэшце, была істотная розніца ў экспрэсіі Fos у аферэнтах IL pPVT паміж групамі з добрым згасаннем, дрэнным згасаннем, успамінамі страху і ў хатніх клетках (X2(3) = 12,34 p = 0,006), таму добрая экспрэсія Fos у IL- была горш, чым у групах вымірання (сярэдняя розніца ў рангах = 12,54, p = 0,014) і ў хатняй клетцы (сярэдняя розніца ў рангах = 12,89, p = 0,049) (мал. 4K) і значна карэлюе з аферэнтамі IL у межах pPVT паміж актывацыяй і адмена вымірання, лепшае запамінанне вымірання было звязана з большай актывацыяй гэтых аферэнтаў IL (rs = -0,438, p = 0,047) (мал. 4L).
Актыўнасць Fos была павялічана ў аферэнтах IL задняга паравентрыкулярнага таламуса (PVT) у пацукоў, якія паказалі добрую рэгрэсію.(A) Не было істотных адрозненняў паміж групамі ў экспрэсіі Fos пры aPVT.(B) Не было значнай карэляцыі паміж экспрэсіяй Fos і запамінаннем вымірання ў aPVT.(C) група ўспамінання страху паказала павышаную экспрэсію Fos у аферэнтах IL у параўнанні з усімі іншымі групамі.(D) Не было істотнай карэляцыі паміж экспрэсіяй Fos у афферентах IL і запамінаннем вымірання ў aPVT.(E) Не было істотных межгрупповых адрозненняў у экспрэсіі Fos пры mPVT.(F) Не было значнай карэляцыі паміж экспрэсіяй Fos і памяццю вымірання пры mPVT.(G) Фос экспрэсія ў афферентных клетках IL ў mPVT істотна не адрознівалася паміж групамі.(H) Не было істотнай карэляцыі паміж экспрэсіяй Fos у афферентах IL і адкліканнем вымірання ў mPVT.(I) Вымерлая група, але не іншая група, паказала павышаную актыўнасць Fos у pPVT у параўнанні з групай хатняй клеткі.(J) Не было значнай карэляцыі паміж экспрэсіяй Fos і запамінаннем вымірання ў pPVT.(K) Група добрага вымірання паказала павышаную экспрэсію Fos у афферентных клетках IL у параўнанні з групай слабага вымірання і групай хатніх клетак.(L) Існуе значная карэляцыя паміж экспрэсіяй Fos у афферентах IL і запамінаннем экстинкции, таму добрае запамінанне экстинкции звязана з большай экспрэсіяй Fos ў афферентах IL.Слупкі памылак прадстаўляюць стандартнае адхіленне сярэдняга значэння. *p <0,05, **p <0,01. *p <0,05, **p <0,01. *р < 0,05, **р < 0,01. *p <0,05, **p <0,01. *p <0,05, **p <0,01. *p <0,05, **p <0,01. *р < 0,05, **р < 0,01. *p <0,05, **p <0,01.
Затым ва ўсіх групах аналізавалі глабальную і спецыфічную для праекцыі IL актыўнасць Fos у aCLA і mCLA пацукоў. Была значная розніца паміж групамі з добрым выміраннем, дрэнным выміраннем, узгадваннем страху і групамі ў хатняй клетцы ў экспрэсіі Fos у aCLA (X2 (3) = 8,455, p = 0,036), так што група ўспамінання страху (сярэдні ранг Diff. = 14,50, p = 0,049), але ні ў групе з беднымі (розніца ў сярэднім рангу = 10,21, p = 0,373), ні ў групах з добрым выміраннем (розніца ў сярэднім рангу = 4,607, p > 0,999) экспрэсія Fos не была большай, чым група ў хатняй клетцы ( Малюнак 5A). Была значная розніца паміж групамі з добрым выміраннем, дрэнным выміраннем, узгадваннем страху і групамі ў хатняй клетцы ў экспрэсіі Fos у aCLA (X2 (3) = 8,455, p = 0,036), так што група ўспамінання страху (сярэдні ранг Diff. = 14,50, p = 0,049), але ні ў групе з беднымі (розніца ў сярэднім рангу = 10,21, p = 0,373), ні ў групах з добрым выміраннем (розніца ў сярэднім рангу = 4,607, p > 0,999) экспрэсія Fos не была большай, чым група ў хатняй клетцы ( Малюнак 5A). Паміж групамі з добрым угашэннем, плохім угашэннем, прыпамінаннем страху і хатнімі клеткамі назіралася значная разніца ў экспрэсіі Fos у aCLA (X2 (3) = 8,455, p = 0,036), так што група прыгадвання страху (сярэдняе рангавае адрозненне = 14,50, p = 0,049), але ні плохая (сярэдняя рангавая разніца = 10,21, p = 0,373), ні група з добрым вымярэннем (сярэдняя рангавая разніца = 4,607, p > 0,999) не дэманстравалі большай экспрэсіі Fos, чым група ў хатняй клетцы ( Рыс 5А). Была значная розніца ў экспрэсіі aCLA Fos паміж групамі з добрым знікненнем, дрэнным знікненнем, прыгадваннем страху і хатнімі клеткамі (X2(3) = 8,455, р = 0,036), так што група прыгадвання страху (сярэдняя розніца ў рангах = 14,50, р = 0,049), але ні ў бедных (сярэдняя розніца ў рангах = 10,21, p = 0,373), ні ў групах з добрым выміраннем (сярэдняя розніца ў рангах = 4,607, p > 0,999) не было больш экспрэсіі Fos, чым у групе хатніх клетак (мал. 5A). . aCLA 中Fos 表达的良好消退、消退差、恐惧回忆和家庭笼组之间存在显着差异(X2 (3) = 8,455, p = 0,036)，因此恐惧回忆组(Сярэдняя розніца ў рангах = 14,50，p = 0,049，但无论是差（平均秩差= 10,21，p = 0,373）还是良好灭绝＝(平均秩差= 4,607，p> 0,999），都显示出比家庭笼组更多的Fos 表达（图5A) . Acla 中 fos 表达 的 消退 、 消退差 、 回忆 和 家庭 笼组 之间 存在 显着 差异 差异 差异 差异 差异 (x2 (3) = 8,455, p = 0,036) ， 因此 恐惧 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 (сярэдняе Розніца ў рэйтынгу = 14,50 ， P = P = P = P = 14. 0,049， 但 无论是 差 平均 秩差 秩差 = 10,21 ， p = 0,373） 良好 灭绝 （平均 秩差 秩差 = 4,607 ， p> 0,999） 组 都 出 比 家庭 笼组 更 多 的 表达 图 图 图 5a) 。 Была значная разніца паміж групамі з добрым угашэннем, плохім угашэннем, водгукам страху і хатняй клеткі па экспрэсіі Fos у aCLA (X2(3) = 8,455, p = 0,036), таму група водгуку страху (сярэдняе рангавае адрозненне = 14,50) , p = 0,049), але групы з плохім (сярэдняя разніца рангаў = 10,21, p = 0,373) і з добрым вымярэннем (сярэдняя разніца рангаў = 4,607, p > 0,999) паказалі больш высокую экспрэсію Fos, чым група з хатняй клеткай (рыс. 5A). Была значная розніца паміж групамі клетак добрага вымірання, дрэннага вымірання, узгадвання страху і хатніх клетак у экспрэсіі aCLA Fos (X2(3) = 8,455, p = 0,036), таму група ўспамінання страху (сярэдняя розніца ў рангах = 14,50), p = 0,049 ), але групы з дрэнным (сярэдняя розніца ў рангах = 10,21, p = 0,373) і добрым выміраннем (сярэдняя розніца ў рангах = 4,607, p> 0,999) паказалі больш высокую экспрэсію Fos, чым група хатніх клетак (мал. 5A). .Не было значнай карэляцыі паміж глабальнай экспрэсіяй Fos у (rs = 0,036, p = 0,876) (малюнак 5B) або экспрэсіяй Fos у аферэнтных клетках IL aCLA (rs = -0,282, p = 0,215) і адкліканнем вымірання (малюнак 5B)..5D), таксама не было істотнай розніцы паміж добрым згасаннем, дрэнным згасаннем, узгадваннем страху і хатнімі групамі клетак у экспрэсіі Fos у аферэнтах aCLA IL (X2(3) = 6,722, p = 0,081) (малюнак 5C)..). Далей была значная розніца паміж групамі добрага вымірання, дрэннага вымірання, узгадвання страху і хатняй клеткі ў экспрэсіі Fos у mCLA (X2 (3) = 10,12, p = 0,018), так што група добрага вымірання (Сярэдняя розніца ў рангу . = 12,93, p = 0,038), але ні ў групе дрэннага вымірання (сярэдні ранг Diff. = 5,143, p > 0,999), ні ў групах узгадвання страху (Mean Rank Diff. = 14,00, p = 0,063) не было значна большай экспрэсіі Fos у mCLA. адносна групы хатняй клеткі (мал. 5E). Далей была значная розніца паміж групамі добрага вымірання, дрэннага вымірання, узгадвання страху і хатняй клеткі ў экспрэсіі Fos у mCLA (X2 (3) = 10,12, p = 0,018), так што група добрага вымірання (Сярэдняя розніца ў рангу . = 12,93, p = 0,038), але ні ў групе дрэннага вымірання (сярэдні ранг Diff. = 5,143, p > 0,999), ні ў групах узгадвання страху (Mean Rank Diff. = 14,00, p = 0,063) не было значна большай экспрэсіі Fos у mCLA. адносна групы хатняй клеткі (мал. 5E). Затым назіралася значная разніца паміж групамі з добрым угашэннем, плохім угашэннем, успамінамі пра страх і хатняй клеткай у экспрэсіі Fos у mCLA (X2 (3) = 10,12, p = 0,018), так што група з добрым угашэннем (сярэдняя разніца). рангов = 12,93, p = 0,038), але ні групы дрэннага ўгашэння (сярэдняя рангавая разніца = 5,143, p > 0,999), ні група водгукаў страху (сярэдняя рангавая разніца = 14,00, p = 0,063) не паказалі значна большай. экспрэсіі Fos ў mCLA. Затым была значная розніца паміж добрым выміраннем, дрэнным выміраннем, успамінамі пра страх і хатнімі групамі клетак у экспрэсіі mCLA Fos (X2(3) = 10,12, р = 0,018), так што група добрага вымірання (сярэдні ранг розніцы = 12,93, р = 0,038), але ні групы з дрэнным выміраннем (сярэдняя розніца ў рангах = 5,143, p> 0,999), ні групы, якія ўспамінаюць страх (сярэдняя розніца ў рангах = 14,00, p = 0,063), не паказалі значна большай экспрэсіі Fos у mCLA.у параўнанні з групай хатняй клеткі (малюнак 5E).接下来 ， 在 mcla 中 的 fos 表达 ， 良好 消退组 、 不良 消 退组 、 恐惧 回忆组 家庭 笼组 之间 显着 差异 （x2 (3） = 10,12 ， p = 0,018） ， 良好 （（（（（（ （（（ Розніца ў сярэднім рангу.= 12,93, p = 0,038)，但在mCLA 中，弱消退（平均秩差= 5,143，p > 0,999）和恐惧回忆组＄(平均秩差= 14,00) ，p = 0,063）均未显示出更多的Fos 表达相对于家庭笼组 (图5E). = 12,93, p = 0,038) ， 在 在 mcla 中 ， 弱消退 （平均 秩差 秩差 秩差 = 5,143 ， p> 0,999） 和 回忆组 （平均 秩差 = 14,00 ， p = 0,063） 未 显示 出 更 多 的fos 表达 表达 的 fos 表达 表达 的 fos 表达相对于家庭笼组（图5E）。 Далей, у экспрэсіі Fos у mCLA назіралася значная разніца паміж групай з добрым угасаннем, групай з плохім угасаннем, групай з водгукам аб страху і групай з хатняй клеткай (X2(3) = 10,12, p = 0,018), так, група добрага пагаршэння (сярэдняя разніца рангаў = 12,93, p = 0,038), але ў mCLA ні слабае пагаршэнне (сярэдняя разніца рангаў = 5,143, p > 0,999), ні група водгукаў страху (сярэдняя разніца рангаў = 14,00, p = 0,999) = 0,063) паказалі лепшую экспрэсію Шмат Фос у параўнанні з групай з хатняй клеткай (Рысунок 5E). Акрамя таго, была значная розніца ў экспрэсіі Fos у mCLA паміж групай з добрым выміраннем, групай з дрэнным выміраннем, групай са зваротнай сувяззю страху і групай хатніх клетак (X2(3) = 10,12, p = 0,018), такім чынам, добрая знікненне (сярэдняя розніца ў рангах = 12,93, p = 0,038), але ў mCLA ні слабае знікненне (сярэдняя розніца ў рангах = 5,143, p> 0,999), ні група ўспамінання страху (сярэдняя розніца ў рангах = 14,00, p = 0,999) = 0,063) не паказалі лепшага. Экспрэсія Multi Fos у параўнанні з хатняй групай клетак (малюнак 5E).Тым не менш, глабальная экспрэсія Fos у mCLA (rs = 0,321, p = 0,156) (мал. 5F) або ў клетках афферентного IL mCLA (rs = -0,121, p = 0,602) і ўспамін аб выміранні (мал. 5H), істотнай розніцы паміж групы з добрым выміраннем, дрэнным выміраннем, успамінаннем страху і хатняй клеткай для экспрэсіі Fos у аферэнтных клетках IL mCLA (X2(3)=4,923, p=0,178) (малюнак 5G).
Актыўнасць Fos была павышана ў сярэдзіне клауструма ў пацукоў з добрай памяццю вымірання.(A) Група, якая ўспамінала страх, але не іншыя групы, паказала павышаную актыўнасць Fos у параўнанні з групай хатніх клетак у aCLA.(B) Не было значнай карэляцыі паміж экспрэсіяй Fos у aCLA і выміраннем памяці.(C) Фос экспрэсіі ў IL афферентных клетках aCLA істотна не адрознівалася паміж групамі.(D) Не было значнай карэляцыі паміж выразам Fos у афферентах IL і выміраннем успамінаў у aCLA.(E) Група добра вымерлых, але не іншыя групы, паказала павышаную актыўнасць Fos у mCLA у параўнанні з групай хатніх клетак.(F) Не было істотнай карэляцыі паміж экспрэсіяй Fos і запамінаннем вымірання ў mCLA.(G) Фос выраз у IL mCLA афферентных клетках істотна не адрозніваецца паміж групамі.(H) Не было істотнай карэляцыі паміж экспрэсіяй Fos у афферентах IL і запамінаннем вымірання ў mCLA.Слупкі памылак прадстаўляюць стандартнае адхіленне сярэдняга значэння. *p <0,05. *p <0,05. *р < 0,05. *p <0,05. *p <0,05. *p <0,05. *р < 0,05. *p <0,05.
Затым ва ўсіх групах пацукоў аналізавалі глабальную і спецыфічную для праекцыі IL актыўнасць Fos у mBLA і pBLA.Не было істотнай розніцы паміж добрым выміраннем, дрэнным выміраннем, узгадваннем страху і групамі хатніх клетак у экспрэсіі Fos у mBLA (X2(3)=0,944, p=0,815) (малюнак 6A).Таксама не было істотнай розніцы паміж групамі з добрай рэгрэсіяй, дрэннай рэгрэсіяй, успамінам страху і экспрэсіяй Fos хатняй клеткі ў аферэнтных клетках IL mBLA (X2(3)=0,518, p=0,915) (малюнак 6C).Акрамя таго, не было істотнай карэляцыі паміж глабальнай экспрэсіяй Fos ў mBLA (rs = 0,126, p = 0,588) (малюнак 6B) і экспрэсіяй Fos ў аферэнтных клетках IL mBLA (rs = 0,200, p = 0,385) (rs = 0,200, p = 0,385).р = 0,385).Малюнак 6D) і ўспамін аб знікненні.Таксама не было істотнай розніцы ў групах клетак добрага вымірання, дрэннага вымірання, памяці страху і хатніх клетак у экспрэсіі Fos у pBLA (X2(3) = 4,246, p = 0,236) (мал. 6E), а таксама не было істотнай розніцы. у pBLA Добра.выміранне, дрэннае выміранне, успамін страху і хатнія групы клетак у экспрэсіі Fos у аферэнтных клетках IL (X2(3)=1,954, p=0,582) (малюнак 6G).Нарэшце, глабальная экспрэсія Fos ў pBLA (rs = 0,070, p = 0,762) (мал. 6F) і экспрэсія Fos у афферентных клетках pBLA IL (rs = 0,122, p = 0,597) і ўспаміны вымірання (мал. 6H).
Індывідуальныя адрозненні ў рэпрадукцыі вымірання не супастаўляліся з адрозненнямі ў экспрэсіі Fos у базолатеральной міндаліне.(A) Не было істотных межгрупповых адрозненняў у экспрэсіі Fos ў mBLA.(B) Не было значнай карэляцыі паміж экспрэсіяй Fos і запамінаннем вымірання ў mBLA.(C) Экспрэсія Fos ў афферентных клетках IL mBLA істотна не адрознівалася паміж групамі.(D) Не было істотнай карэляцыі паміж экспрэсіяй Fos у афферентных клетках IL і адкліканнем вымірання ў mBLA.(E) Не было істотных межгрупповых адрозненняў у экспрэсіі Fos ў pBLA.(F) Не было значнай карэляцыі паміж экспрэсіяй Fos і запамінаннем вымірання ў pBLA.(G) Фос экспрэсія ў клетках афферентного IL pBLA істотна не адрознівалася паміж групамі.(H) Не было істотнай карэляцыі паміж экспрэсіяй Fos у афферентных клетках IL і адкліканнем вымірання ў pBLA.Слупкі памылак прадстаўляюць стандартнае адхіленне сярэдняга значэння.
Нарэшце, глабальная і спецыфічная для праекцыі IL актыўнасць Fos была прааналізавана ў mvHPC і pvHPC ва ўсіх пацукоў. Была значная розніца паміж групамі добрага вымірання, дрэннага вымірання, узгадвання страху і хатняй клеткі ў экспрэсіі Fos у mvHPC (X2 (3) = 8,056, p = 0,045), так што добрае выміранне (сярэдняя розніца рангаў = 13,29) , p = 0,031), але ні ў групах са слабым выміраннем (Сярэдняя розніца ў рангах = 6,857, p > 0,999), ні ўспаміну страху (Сярэдняя розніца ў рангах = 8,000, p = 0,864) выяўлена больш Fos, чым у групе хатняй клеткі (мал. 7A). Была значная розніца паміж групамі добрага вымірання, дрэннага вымірання, узгадвання страху і хатняй клеткі ў экспрэсіі Fos у mvHPC (X2 (3) = 8,056, p = 0,045), так што добрае выміранне (сярэдняя розніца рангаў = 13,29) , p = 0,031), але ні ў групах са слабым выміраннем (Сярэдняя розніца ў рангах = 6,857, p > 0,999), ні ўспаміну страху (Сярэдняя розніца ў рангах = 8,000, p = 0,864) выяўлена больш Fos, чым у групе хатняй клеткі (мал. 7A). Паміж групамі з добрым угашэннем, плохім угашэннем, водгукам страху і хатнімі клеткамі назіралася значная разніца ў экспрэсіі Fos у mvHPC (X2 (3) = 8,056, p = 0,045), так што добрае ўгашэнне (сярэдняя рангавая разніца = 13,29) , p = 0,031), але ні ў групах з плохім угасаннем (сярэдняя рангавая разніца = 6,857, p > 0,999), ні ў групе з водгукам страху (сярэдняя рангавая разніца = 8,000, p = 0,864) экспрэсія Fos была вышэй, чым у групе з хатняй. клеткай (рыс. 7А). Была значная розніца ў экспрэсіі mvHPC Fos паміж групамі з добрым выміраннем, дрэнным выміраннем, узгадваннем страху і хатнімі клеткамі (X2(3) = 8,056, p = 0,045), таму добрае выміранне (сярэдняя розніца ў рангах = 13,29), p = 0,031), але ні ў групе дрэннага вымірання (сярэдняя розніца ў рангах = 6,857, p> 0,999), ні ў групе ўспамінання страху (сярэдняя розніца ў рангах = 8,000, p = 0,864) экспрэсія Fos не была вышэй, чым у хатняй групе.вочка (мал. 7А). mvHPC 中Fos 表达的良好消退、不良消退、恐惧回忆和家庭笼组之间存在显着差异＂（X2 (3) = 8,056, p = 0. 045，因此良好消退（平均秩差= 13,29，p = 0,031 ），但无论是弱消退（平均秩差= 6,857，p > 0,999）还是恐惧回忆（平均秩差= 8,000，p = 0,864）组都显示出比家庭笼组更多的Fos 表达（图2）。. mvhpc 中 fos 表达 的 消退 、 不良 消退 恐惧 回忆 和 家庭 笼组 之间 存在 显着 差异 （（x2 (3) = 8. 056, p = 0,045） 良好 （（（平均 秩差 秩差 = 13,29） p = 0,031 ） ， 无论是 弱消退 （平均 秩差 秩差 = 6,857 ， p> 0,999） 还是 恐惧 （平均 秩差 秩差 = 8,000 ， p = 0,864） 组都 出 家庭 笼组 多 的 fos 表达 图 图。。。。 )))))) Была значная разніца паміж групамі «хорошо», «плохо», «прыпамінанне страху» і «хатняя клетка» для экспрэсіі Fos у mvHPC (X2(3) = 8,056, p = 0,045) і, следовательно, добрая рэгрэсія (сярэдняя разніца рангов = 13,29), p = 0,031), але групы са слабым пагаршэннем (сярэдняя разніца рангаў = 6,857, p > 0,999) і ўспаміны пра страх (сярэдняя разніца рангаў = 8,000, p = 0,864) паказалі больш высокую экспрэсію Fos, чым група ў хатняй клетцы (рыс. 2). Была значная розніца паміж групамі добрых, дрэнных, прыгадвання страху і хатніх клетак для экспрэсіі Fos у mvHPC (X2(3) = 8,056, p = 0,045) і, такім чынам, добрая рэгрэсія (сярэдняя розніца ў рангах = 13,29), p = 0,031), але групы са слабым выміраннем (сярэдняя розніца ў рангах = 6,857, p> 0,999) і ўспамінамі страху (сярэдняя розніца ў рангах = 8,000, p = 0,864) паказалі больш высокую экспрэсію Fos, чым група ў хатняй клетцы (мал. 2).7A).Аднак значнай розніцы не было (X2(3) = 4,893, p = 0,180) (малюнак 7C).Акрамя таго, не было істотнай карэляцыі паміж глабальнай экспрэсіяй Fos ў mvHPC (rs = -0,233, p = 0,309) (малюнак 7B) і экспрэсіяй Fos у аферэнтных клетках IL mvHPC (rs = 0,056, p = 0,810) (малюнак 7D).і пратакол аб знікненні.Акрамя таго, не было істотнай розніцы паміж добрым выміраннем, дрэнным выміраннем, узгадваннем страху і хатнімі групамі клетак у экспрэсіі Fos у pvHPC (X2(3) = 3,623, p = 0,353) (малюнак 7E), і не было істотных адрозненняў.розніца ў добрай рэгрэсіі экспрэсіі Fos у аферэнтных клетках pvHPC IL, дрэннай рэгрэсіі, памяці страху і групах хатніх клетак (X2(3)=3,871, p=0,276) (мал. 7G).Нарэшце, не было істотнай карэляцыі паміж глабальнай экспрэсіяй Fos pvHPC (rs = -0,127, p = 0,584) (малюнак 7F) і экспрэсіяй Fos у IL-аферэнтных клетках pvHPC (rs = 0,176, p = 0,447) і адкліканнем вымірання (малюнак 7F). ).7H).
Экспрэсія Fos павышана ў вентральным гіпакампа пацукоў, што паказвае на добрае адміранне памяці.(A) Група добра вымерлых, але не іншыя групы, паказала павышаную экспрэсію Fos у mvHPC у параўнанні з групай хатніх клетак.(B) Не было істотнай карэляцыі паміж экспрэсіяй Fos і запамінаннем вымірання ў mvPHC.(C) Fos выраз у mvHPC афферентных клетак IL істотна не адрозніваецца паміж групамі.(D) Не было істотнай карэляцыі паміж экспрэсіяй Fos у афферентах IL і запамінаннем вымірання ў mvHPC.(E) Там не было істотных адрозненняў паміж групамі ў выразе Fos ў pvHPC.(F) Не было значнай карэляцыі паміж выразам Fos і выміраннем успамінаў у pvHPC.(G) Фос экспрэсія ў pVHPC афферентных клетак IL істотна не адрознівалася паміж групамі.(H) Не было істотнай карэляцыі паміж выразам Fos у афферентах IL і выміраннем памяці ў pvHPC.Слупкі памылак прадстаўляюць стандартнае адхіленне сярэдняга значэння. *p <0,05. *p <0,05. *р < 0,05. *p <0,05. *p <0,05. *p <0,05. *р < 0,05. *p <0,05.Наш першасны аналіз для ўсіх рэгіёнаў паказаў параўнанне на трох узроўнях уздоўж пярэдне-задняй восі, хоць мы таксама прааналізавалі кожную вобласць, якая разбурылася ўздоўж пярэдне-задняй восі.Вынікі гэтых аналізаў прадстаўлены ў табліцы 1.
Тут мы праверылі, ці будуць індывідуальныя адрозненні ў запамінанні вымірання адлюстраваны ў розных мадэлях аферэнтнай актыўнасці ў ніжняй лімбічнай кары.З гэтай мэтай мы ацанілі актыўнасць Fos у праекцыях IL з паравентрикулярного таламуса, клауструма, базалатэральнай міндаліны і вентральнага гіпакампа пасля прайгравання вымірання.У IL-праецыруючых клетках мы выявілі больш высокую актыўнасць у задняй вобласці PVT у пацукоў, якія прадэманстравалі добрую памяць аб выміранні ў параўнанні з пацукамі з дрэнным выміраннем.Не было адрозненняў у аферэнтах IL ад ключычнага ядра, вентральнага гіпакампа або базолатеральной міндаліны.У дадатак да клетак, якія праецыруюць IL, павышаная нервовая актыўнасць назіралася ў асобных абласцях каластрума пацукоў і вентральнага гіпакампа з добрым дазволам.Нашы вынікі паказваюць, што паспяховае выміранне памяці арганізавана спецыфічнымі праекцыямі PVT на IL і не-IL-таргетынг клетак у клауструме і вентральным гіпакампа.
Мы выявілі, што прагназаванне PVT IL было актыўным у пацукоў, якія паказалі добрую памяць аб выміранні, што супадае з нядаўнім даследаваннем, якое паказала, што PVT патрабуецца для запамінання вымірання.Гэта даследаванне не выкарыстоўвала спецыфічныя для субрэгіёна маніпуляцыі, але паказала, што для прайгравання вымірання неабходны як праекцыі PVT на латэральнай цэнтральнай міндаліне, так і праекцыі IL на PVT.Нашы вынікі паказваюць, што, у дадатак да IL-PVT-CeL ланцуга, пост-PVT ўваход у IL можа таксама спатрэбіцца для гасіць адклікання.Такім чынам, атрымліваецца, што ў прайграванні экстинции ўдзельнічаюць як эферэнтныя, так і аферэнтныя сувязі ІЛ.Важным наступным крокам з'яўляецца вызначэнне таго, што прымушае pPVT сігналізаваць пра прайграванне вымірання на ўзроўні нервовай ланцуга.У дадатак да ўзаемасувязі з IL, папярэднія даследаванні адсочвання параток 31,32 паказалі, што pPVT атрымлівае ўваходныя дадзеныя ад вентральнага периакведуктального шэрага (vPAG), які звязаны з навучаннем выміранню 33,34,35,36.Нягледзячы на ​​​​тое, што роля vPAG у прыгадванні вымірання не ўстаноўлена, прагноз pPVT па vPAG з'яўляецца прывабным кандыдатам з-за іх шчыльнасці і ўдзелу абодвух рэгіёнаў у стварэнні папярэдніх доказаў страху вымірання.
Іншым важным аспектам нашых вынікаў PVT з'яўляецца тое, што яны спецыялізуюцца па сваёй пярэдняй-задняй восі.Дзіўна, што нейронавая актыўнасць праекцыі PVT ў IL карэлюе з процілеглым паводніцкім станам, такім чынам, што да праекцыі PVT актыўнасць у IL звязана з успамінам страху, у той час як праекцыя pPVT актыўная пасля паспяховага вымірання ўспомніць (г.зн. страху).Гэтая функцыянальная гетэрагеннасць у рамках PVT не дзіўна, улічваючы папярэднюю працу [абмяркоўваецца ў 37].Яркі прыклад функцыянальнага размеркавання пры ПВТ нядаўна з'явіўся ў даследаванні, якое ахарактарызавала ўласцівасці пэўных тыпаў клетак пры ПВТ.Гэта даследаванне паказвае, што клеткі дофаміна, якія экспрэсуюць DRD2, пераважна экспрэсуюць у pPVT, інервуюць кару пярэдніх канечнасцяў і рэагуюць на агідныя раздражняльнікі.Другая клеткавая папуляцыя пераважна выяўляецца ў aPVT і адзначае пераход у стан нізкага фізіялагічнага ўзбуджэння і інервуе кару ніжніх канечнасцяў.Нашы вынікі наўрад ці ўпісваюцца ў гэтую мадэль, паколькі IL-праецыруючыя клеткі aPVT актыўныя падчас успамінання страху, у той час як праекцыі pPVT актыўныя, і жывёлы дэманструюць нізкі ўзровень страху.Ёсць як мінімум два магчымыя тлумачэнні відавочнага неадпаведнасці.Па-першае, ідэнтыфікаваныя тыпы клетак не размешчаны выключна ў адным пярэдне-заднім участку TVV.Такім чынам, актыўныя IL-праецыруючыя клеткі pPVT у пацукоў з добрай памяццю вымірання могуць належаць да класа клетак, якія з большай верагоднасцю выяўляюцца ў aPVT і сігналізуюць аб пераходзе ў стан нізкага ўзбуджэння.Тое ж самае можа быць дакладна для IL-праецыруючых клетак у aPVT, актываваных пасля памяці страху.Па-другое, папярэднія даследаванні адсочвання выявілі наяўнасць pPVT, якія праецыруюць IL3, хоць некаторыя з іх, здаецца, паходзяць з клетак, якія змяшчаюць DRD2, іншыя тыпы клетак могуць праецыравацца на IL і актывавацца пры паспяховым прайграванні гашэння.
Нягледзячы на ​​тое, што мэтай гэтага даследавання было выяўленне адрозненняў паміж пацукамі, якія дэманструюць розныя фенатыпы вымірання, гэтыя эксперыменты таксама выявілі новыя дадзеныя, звязаныя з механізмамі памяці страху.Цікава, што мы выявілі павышаную актыўнасць Fos на пярэдняй CLA ў пацукоў з памяццю страху.
Ключыца пазіцыянуецца як цэнтр коркавай сувязі і ўдзельнічае ў працэсах, пачынаючы ад сэнсарнай інтэграцыі да ўвагі і сну40,41,42,43.Існуюць абмежаваныя дадзеныя аб тым, як клауструм удзельнічае ў кандыцыянаванні або выяўленні страху, аднак ранейшыя даследаванні паказалі, што кантэкстнае выражэнне страху ўдзельнічае ў актыўнасці Fos у клауструме.Нядаўна было паведамлена, што тармажэнне праекцый атрэзіі ў энтарынальнай кары падчас кантэкстуальнага кандыцыянавання страху пагаршае фарміраванне доўгатэрміновай памяці, хоць іх патрэба ў выражэнні страху не была праверана.У тым жа даследаванні павышаная актывацыя Fos назіралася, калі жывёлы падвяргаліся ўздзеянню новага асяроддзя ў параўнанні з мышамі, якія падвяргаліся ўздзеянню знаёмага асяроддзя.Маючы гэта на ўвазе, актывацыя CLA, пра якую мы паведамляем тут, можа быць звязана з уздзеяннем новай камеры падчас тэставання, а не страхам адклікання.Каб больш дакладна ахарактарызаваць функцыю блакіровак пры страху і сітуацыйнай апрацоўцы, будучыя даследаванні павінны выкарыстоўваць мэтанакіраваную маніпуляцыю замкамі.
Нягледзячы на ​​тое, што папярэдняя праца паказала, што PVT звязаны з праявай памяці страху,45,46,47 мы не назіралі ніякіх змен у агульнай экспрэсіі Fos у пацукоў, калі яны ўспаміналі пра страх праз 48 гадзін пасля кандыцыянавання.Гэтую розніцу можна растлумачыць некалькімі фактарамі, у тым ліку папярэдняй працай па тэставанні страху перад асобнымі сігналамі ў тым жа кантэксце, у якім адбывалася кандыцыянаванне, у той час як у нашым эксперыменце тэставанне праводзілася ў новым пакоі.Акрамя таго, мы ўсыпілі нашых жывёл праз 60 хвілін пасля тэставання, у той час як у папярэдняй працы выкарыстоўваўся момант часу ў 90 хвілін.Нарэшце, у папярэдніх даследаваннях тэст праводзіўся ў памяшканні, дзе жывёлы маглі рэагаваць апетытам, у той час як у нашай працы пацукі тэставаліся без рэакцыі апетыту.Нягледзячы на ​​тое, што гэта дапускае некаторую ступень умоўнага тармажэння, ёсць доказы таго, што дазвол жывёлам стрымліваць ціск, каб атрымаць ежу падчас праверкі, ці баяцца яны сігналаў, стварае матывацыйны канфлікт (напрыклад, страх супраць узнагароды), які з'яўляецца ключавым стымулюючым фактарам.удзел PVT48, 49. .
Вядома, што базалатэральная міндаліна ўдзельнічае ў набыцці згасання страху50,51, і ёсць доказы таго, што праекцыі BLA на IL таксама ўдзельнічаюць у гэтым працэсе23.Аднак незразумела, ці ўдзельнічае BLA і яго сувязі ў вяртанні вымірання.Даследаванні візуалізацыі23,28 паказалі павышаную актыўнасць BLA ў жывёл, якія ўспамінаюць бляклыя ўспаміны.У той час як наша папярэдняя праца не паказала розніцы ў актывацыі BLA паміж добрымі і дрэннымі выміраючымі пацукамі, нашы вынікі сведчаць аб тым, што запамінанне вымірання звычайна не ўплывае на BLA або актывацыю пры прагназаванні BLA IL.У адпаведнасці з нашымі высновамі, хаця даследаванні маніпулявання схемамі паказваюць, што ўваходныя дадзеныя IL у BLA важныя для вывучэння вымірання, яны не неабходныя для ўспамінання вымірання.Аднак нельга цалкам ігнараваць ролю BLA, паколькі апошнія дадзеныя сведчаць аб тым, што пэўныя тыпы клетак у BLA неабходныя для прайгравання вымірання.
Характэрна, што прыгадванне страху не прывяло да актывацыі Fos у BLA, паколькі папярэднія даследаванні пашкоджанняў, прэпаратаў і візуалізацыі ўцягвалі гэтую вобласць у выражэнне страху і/або аднаўленне страху пасля пошуку54,55,56,57.Дадзеныя, прадстаўленыя тут, аб'ядноўваюць базальнае і латэральнае пад'ядра міндаліны, і папярэднія дадзеныя сведчаць аб тым, што выраз страху кіруе актыўнасцю Fos на дорсальной баку латэральнага ядра.Мы прааналізавалі асноўныя і бакавыя даныя паасобку, але ні ў адным, ні ў іншым выпадку не было розніцы (дадзеныя не паказаны), і абедзве вобласці згорнуліся ў прадстаўленых тут даных.Мы не аналізавалі подобластей латэральнай міндаліны, таму спецыфічныя змены ў гэтай галіне могуць быць замаскіраваныя.Іншая магчымасць адсутнасці змяненняў у актыўнасці Fos у BLA звязана з часам успамінаў страху ў параўнанні з кандыцыянаваннем.Некаторыя папярэднія працы паказалі, што ўклад BLA у праяву страху памяншаецца з часам пасля кандыцыянавання, так што экспрэсія BLA залежыць праз 24 гадзіны пасля кандыцыянавання, але не залежыць праз 7 дзён (спасылка 45, але гл. 58).адбылося праз 48 гадзін пасля трэніроўкі, што робіць адсутнасць змяненняў у актыўнасці Fos у гэты момант часу, верагодна, адлюстроўвае залежныя ад часу змены ўдзелу BLA ў выяўленні страху.
Нарэшце, мы знаходзім доказы таго, што памяць пра паспяховае выміранне звязана з вентральным гіпакампам.Гэта характэрна для «прамежкавых» vHPCs, паколькі такая ж карціна не была заўважана ў задняй вобласці.У адпаведнасці з папярэдняй працай мы не выявілі ніякіх зменаў у актывацыі Fos у аферэнтных vHPC IL.Ёсць істотныя доказы таго, што vHPC28,60,61 неабходны для актуалізацыі страху, калі CS адбываецца па-за кантэкстам, у якім адбываецца заміранне, і што гэта, па меншай меры, часткова залежыць ад ўваходжання vHPC у IL13.Грунтуючыся на гэтых папярэдніх выніках, мы чакаем, што дрэннае заміранне будзе звязана з павелічэннем прагназуемай актыўнасці IL vHPC.Аднак гэта было не так, паколькі не было ніякай розніцы ў актыўнасці Fos у IL-праецыраваных рэтраградна-пазначаных vHPCs або немеченых клетках vHPCs.Гэта сведчыць аб тым, што няздольнасць запомніць згасанне ў кантэксце згасання можа выклікаць іншы механізм, чым страх абнаўлення.
Важна адзначыць некаторыя з уласцівых дызайну і аналізу абмежаванняў і тое, як яны ўплываюць на нашы высновы.Па-першае, мы падзялілі жывёл на верхнюю і ніжнюю траціны, а мышэй — на «добрых» і «дрэнных», зыходзячы з паказчыкаў памяці аб знікненні.Гэта робіцца для таго, каб пазбегнуць групавых схем, якія дзеляць жывёл на асобныя групы з сярэдзіны размеркавання, або групавых схем, якія выключаюць жывёл з сярэдзіны размеркавання, такіх як падзел па медыяне або параўнанне верхняй і ніжняй трацін пацукоў. .мы хочам пазбегнуць гэтай сітуацыі, таму што сярэдняе дзяленне не адлюстроўвае зменлівасць чалавечых рэакцый на траўму, якія мы спрабуем мадэляваць.Акрамя таго, у той час як параўнанне верхняй і ніжняй трацін пацукоў дазваляе параўноўваць групы аднолькавага памеру, гэты падыход ігнаруе жывёл у цэнтры размеркавання і не адлюстроўвае дакладна зменлівасць рэакцый на траўму.Нягледзячы на ​​тое, што наш метад можа пакутаваць ад праблем з гетэрагеннай дысперсіяй і параўнаннем груп з няроўнымі памерамі выбаркі, ён улоўлівае тое, што мы спрабуем імітаваць, лепш, чым альтэрнатыўныя метады.
Прадстаўленыя тут вынікі дапамагаюць нам лепш зразумець, як індывідуальныя адрозненні ў запамінанні вымірання адлюстроўваюцца на адрозненнях у актыўнасці нервовых ланцугоў.Нашы высновы могуць мець дачыненне да посттраўматычнага стрэсавага расстройства, якое, як вядома, звязана з празмерным страхам і няздольнасцю ліквідаваць рэакцыі на страх.Мы паказваем, што адрозненні ва ўспамінах вымірання звязаны з адрозненнямі ва ўнутранай і знешняй нервовай актыўнасці, якая праецыруецца на IL.Гэтыя адрозненні былі размеркаваны па розных рэгіёнах уздоўж пярэдняй задняй восі, яшчэ больш падкрэсліваючы важнасць ацэнкі функцыі мозгу на субрэгіянальным узроўні.Да недахопаў цяперашняга метаду можна аднесці актуальнасць даследавання і арыентаванасць на самцоў грызуноў.Будучыя даследаванні павінны вызначыць нейрабіялагічныя механізмы, якія ляжаць у аснове навучання вымірання ў самак грызуноў, і выкарыстаць метады, каб зрабіць прычынныя высновы.
Наборы дадзеных, выкарыстаныя і/або прааналізаваныя ў бягучым даследаванні, даступныя ў адпаведных аўтараў па абгрунтаваным запыце.
Паўлаў І. П. Кандыцыянаванне: вывучэнне фізіялагічнай дзейнасці кары галаўнога мозгу.(Oxford University Press, 1927).
Rothbaum, BO, & Davis, M. Прымяненне прынцыпаў навучання для лячэння посттраўматычных рэакцый. Rothbaum, BO, & Davis, M. Прымяненне прынцыпаў навучання для лячэння посттраўматычных рэакцый.Rotbaum BO і Дэвіс М. Прымяненне прынцыпаў навучання для лячэння посттраўматычных рэакцый.Rotbaum BO і Дэвіс М. Прымяненне прынцыпаў навучання ў лячэнні посттраўматычных рэакцый.ўсталяваць.Нью-Йоркскі каледж.навука.1008 (1), 112-121 (2003).
Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI Агляд экспазіцыйнай тэрапіі: залаты стандарт лячэння ПТСР. Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI Агляд экспазіцыйнай тэрапіі: залаты стандарт лячэння ПТСР.Rauch SA, Eftekhari A. і Ruzek DI Агляд экспазіцыйнай тэрапіі: залаты стандарт лячэння посттраўматычнага стрэсавага засмучэнні. Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI 暴露疗法回顾：ПТСР 治疗的黄金标准。 Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI Агляд экспазіцыйнай тэрапіі: Залаты стандарт лячэння ПТСР.Rauch, SA, Eftekhari, A. і Ruzek, DI Агляд экспазіцыйнай тэрапіі: залаты стандарт лячэння посттраўматычнага стрэсавага засмучэнні.Ж. Рэабілітацыя.распрацоўка вадасховішча 49, 679–687.https://doi.org/10.1682/jrrd.2011.08.0152 (2012).
Foa, EB Тэрапія доўгага ўздзеяння: мінулае, сучаснасць і будучыня.Падаўленне трывогі 28, 1043–1047.https://doi.org/10.1002/da.20907 (2011).
Містэр Мілард і інш.Экзістэнцыяльныя і набытыя прычыны страты памяці пры посттраўматычным стрэсавым засмучэнні: вынікі даследавання двайнят.Ж. Псіхіятр.назапашвальны бак.42 (7), 515-520 (2008).
Містэр Мілард і інш.Нейрабіялагічныя асновы няздольнасці ўспомніць знікаючыя ўспаміны пры посттраўматычным стрэсавым засмучэнні.біялогіі.Псіхалогія.66 (12), 1075-1082 (2009).
Буш, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE. Індывідуальныя адрозненні ў страху: ізаляваная рэактыўнасць страху і фенатыпы аднаўлення страху. Буш, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE. Індывідуальныя адрозненні ў страху: ізаляваная рэактыўнасць страху і фенатыпы аднаўлення страху.Буш, DEA, Sautre-Baillon, F. і LeDoux, JE. Індывідуальныя адрозненні ў страху: адрозненні фенатыпу рэактыўнасці страху і аднаўлення страху. Буш, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE 恐惧的个体差异：隔离恐惧反应和恐惧恢复表型。 Буш, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE. Індывідуальныя адрозненні ў страху: ізаляцыя рэакцыі на страх і табліца аднаўлення страху.Буш, DEA, Sautre-Baillon, F. і LeDoux, JE. Індывідуальныя адрозненні ў страху: ізаляцыя рэакцый на страх і фенатып аднаўлення страху.Ж. Траўма.ціск 20 (4), 413–422 (2007).
Russo, AS & Parsons, RG. Акустычная рэакцыя спалоху ў пацукоў прадказвае міжасобныя варыяцыі ў знікненні страху. Russo, AS & Parsons, RG. Акустычная рэакцыя спалоху ў пацукоў прадказвае міжасобныя варыяцыі ў знікненні страху.Русо, А. С. і Парсанс, Р. Г. Акустычная рэакцыя спалоху ў пацукоў прадказвае індывідуальныя адрозненні ў знікненні страху. Russo, AS & Parsons, RG 大鼠的声学惊吓反应预测恐惧消退的个体差异。 Russo, AS і Парсанс, RGРусо, А. С. і Парсанс, Р. Г. Акустычная рэакцыя спалоху ў пацукоў прадказвае індывідуальныя адрозненні ў знікненні страху.Нейрабіялогія.даследаванне.Памяць.139, 157–164 (2017).
Russo, AS, Lee, J. & Parsons, RG. Індывідуальная варыябельнасць успамінаў аб згасанні страху звязана з фасфараляваннем мітаген-актываванай протеинкиназы ў інфралімбічнай кары. Russo, AS, Lee, J. & Parsons, RG. Індывідуальная варыябельнасць успамінаў аб згасанні страху звязана з фасфараляваннем мітаген-актываванай протеинкиназы ў інфралімбічнай кары.Russo, AS, Lee, J. і Parsons, RG. Індывідуальная зменлівасць у згасанні ўспамінаў страху звязана з мітаген-актываваным фасфараляваннем протеинкиназы ў інфралімбічнай кары. Russo, AS, Lee, J. & Parsons, RG 回忆恐惧消退的个体差异与边缘下皮质中丝裂原活化蛋白激酶的磷酸化有关。. Russo, AS, Lee, J. & Parsons, RG. Успамін аб знікненні страху звязаны з індывідуальнымі адрозненнямі ў перыферычнай фасфарыфікацыі.Russo, AS, Lee, J. і Parsons, RG. Індывідуальныя адрозненні ў знікненні страху падчас адклікання звязаны з фасфараляваннем мітаген-актываваных протеинкиназ ў кары ніжніх канечнасцяў.Псіхафармакалогія 236 (7), 2039–2048 (2019).